前言

骨缺损修复是骨科、口腔医学及生物材料领域的重要研究方向。构建高度仿真的骨缺损动物模型，是评估新型骨修复材料，探究骨再生机制的关键基础。本文聚焦于骨缺损动物模型的构建策略与技术要点，旨在助力科研人员优化实验设计，加速骨再生研究成果的转化。

常用动物模型以及选择要点

在骨缺损研究中，大小鼠模型凭借其遗传可控性、成本效益及成熟评价体系，是较为常用的实验动物类型。建议根据研究目标以及经费预算综合决策。

*哈弗氏系统：是人类骨骼中特有的结构，对骨骼的重建和营养供应起到重要作用。大小鼠缺乏该系统，因此在模拟人类骨骼重建过程方面存在一定局限。

模型构建的核心技术要点

一、 精准缺损制备

（1）使用定制钻头，减少热损伤，保留骨膜完整性

（2）临界尺寸控制：损过小观察期内自行愈合过快会影响实验结果，对药物或者材料是否具有成骨作用的评估容易导致误判。因此1986年有学者提出临界性骨缺损（bone size defect，CSD）的概念，指动物一生中不会自动愈合的最小尺寸的骨缺损。CSD定义为周径的1.5-2.5倍或缺损长度为模型对象的1/10以上，超过该范围会出现缺损不愈合

*临界性骨缺损（CSD）：指动物一生中不会自动愈合的最小尺寸的骨缺损。其定义为骨缺损周径达到正常骨周径的 1.5 - 2.5 倍，或者缺损长度超过模型对象骨骼长度的 1/10，超出这个范围，骨缺损通常难以自行愈合。

二、 标准化操作流程

麻醉监护，无菌操作，术后护理，保障动物福利与数据可重复性。

拓普骨缺损动物模型案例

骨缺损模型造模方法分为非手术法和手术法，非手术法主要包括药物诱导和物理方法。例如，通过注射特定药物（如木瓜蛋白酶）诱导骨缺损。这种方法操作相对简便，但无法精确控制缺损的大小和形状，模拟临床骨缺损的复杂性和修复过程方面存在一定的局限性。最常用的为手术法。

科研思路：

一 、模型构建

首先确定使用的动物，缺损部位与大小

图 1：大鼠股骨远端圆柱形骨缺损制备示意图

用3mm骨钻在大鼠股骨远端钻孔，制备直径3mm，深度3mm的圆柱形缺损（如有植入材料，需确认植入材料的大小，方向，选择合适的钻头）

图 2：小鼠下颌第一磨牙缺损位置示意图

小鼠下颌第一磨牙缺损以远中尖为参考点，缺损位于远中尖水平、牙槽骨冠方边缘下1mm处，缺损直径为0.5mm，深度为0.25mm

二、 实验设计

分组设计：一般设置假手术组和实验组

三、 观察指标

包括骨缺损愈合情况、新骨形成、骨组织结构、生物力学性能等。评价的方法可有：

（1）影像学检测：DR检测，动态检测新骨形成速率；Micro CT（定量分析骨密度，骨小梁厚度、骨体积分数等数据）

根据Micro CT结果，与对照组相比，治疗后Micro CT骨小梁体积、厚度和数量明显增加，骨小梁分离减少 

https://doi.org/10.1111/cpr.13035

（2）病理验证：骨缺损处组织HE染色，Masson染色，进行联合分析，计算软组织占比，编织骨占比，皮质骨占比，评估新骨形成的质量和成熟度。

HE染色

（3）生物力学检测 ：三点弯曲试验，压缩试验评估修复后骨强度恢复情况

（4）生化检测：成骨活性和骨代谢指标（碱性磷酸酶、Ⅰ型原胶原羧基端前肽、Runx2、OCN等）

展望

多学科融合：未来骨缺损研究将更加注重多雪珂融合，结合材料科学、生物学、医学等多学科只是、开发更接近人体生理环境的骨修复材料。

个性化治疗：随着基因检测和生物信息学的发展，有望实现骨缺损的个性化治疗，根据患者的基因特征和病情选择最适合的治疗方法。

临床转化：进一步加强基础研究与临床应用的结合，将实验室研究成果更快地转化为临床治疗方法，造福患者。

总之，骨缺损动物模型在骨组织工程研究中具有重要地位。通过合理构建大小鼠骨缺损模型，深入探索骨修复机制和材料性能，有望为骨缺损的临床治疗提供更有效的解决方案。作为骨科再生医学研究领域的专业合作伙伴，深圳灵赋拓普提供从模型设计、手术造模到表型分析的一站式动物实验服务，可精准构建啮齿类动物（大鼠/小鼠）、中大型动物（兔，犬、绵羊）的颅骨、胫骨、股骨、牙槽骨等部位的标准化或定制化骨缺损模型，助力科研突破，促进高效转化。

参考文献：Hanghang Liu, Shibo Liu, Huanzhong Ji,et al. An adiponectin receptor agonist promote osteogenesis via regulating bone-fat balance.Cell Proliferation. 2021;54:e13035.

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