想必做过繁育课题的科研人都会思考：怎样提高小鼠的繁育成功率？答案是：小鼠动情期合笼，成功率最高。本文将带您深入探秘小鼠动情周期，并分享实操经验。
小鼠动情周期是雌性小鼠生殖系统的周期性变化，通常持续 4 - 5 天，包括卵泡发育、排卵和子宫内膜准备等过程，受雌激素和孕激素等内分泌激素调控，与人类月经周期类似。
二、动情周期区分方法
1.生殖器官外观：小鼠生殖器官在不同动情周期阶段有变化，如子宫颜色和大小、卵巢大小等，但观察需解剖小鼠，会造成伤害。
2.行为特征：小鼠在动情周期不同阶段行为有差异，如活动性增加、尿液标记物变化等，但观察较主观，结果准确性欠佳。
3.阴道细胞涂片：通过取小鼠阴道内细胞涂片，观察阴道上皮细胞形态变化确定动情周期阶段。动情周期不同阶段，阴道细胞形态会改变，如核的形状和大小。
三、阴道细胞涂片实操经验
a.用显微镊卷米粒大小棉絮，沾湿生理盐水，插入小鼠阴道口 0.5 - 1cm，贴阴道壁从里往外刮 10 次（大鼠用棉棒，且保持每只鼠力度与次数一致）。
b.将镊子棉球放玻片中央正上空，滴加生理盐水至有液滴挂在棉球但不掉落，慢慢转动棉棒使细胞尽量多洗进液滴。
c.将液滴从玻片中央往四周平铺（棉棒不触玻片，防细胞破裂），自然风干。
四、依据涂片区分动情期
阴道脱落细胞主要有白细胞、有核上皮细胞、角化细胞 3 种。
1、动情前期：涂片大部分是有核上皮细胞，偶有少量角化细胞。
2、动情期：随着卵泡加速生长，有核上皮细胞逐渐转化成成熟无核角化细胞，此时全部是无核角化细胞或间有少量上皮细胞。
3、动情后期：随即开始出现白细胞，无核角化细胞慢慢减少，出现 3 种细胞（白细胞、角化细胞、有核上皮细胞）同时存在的现象。
4、动情间期：随后，角化细胞不断减少，白细胞不断增多，转化为以白细胞为主，逐渐进入动情间期；通常见到以角化细胞为主则认为进入动情期。
五、阴道涂片在疾病模型研究中的应用
阴道涂片不仅是小鼠动情周期区分的重要实验手段，还广泛应用于多种疾病模型的研究，帮助研究者更好地理解疾病的发生机制和评估药物的治疗效果。下面就来看看阴道涂片如何与以下几个常见疾病模型相关联。
大鼠子宫腺肌症模型
（他莫昔芬乳鼠滴喂诱导）
子宫腺肌症子宫腺肌症是指子宫内膜组织在子宫肌层内生长，形成腺体和基质，与雌激素水平相关。阴道涂片可评估激素效应，帮助了解病理进展和激素治疗效果。
· 应用： 通过阴道涂片观察大鼠在不同激素处理下的动情周期变化，研究人员可以更清楚地了解到激素如何促使子宫腺肌症的发生。尤其是在研究雌激素对内膜样组织生长的影响时，阴道涂片的结果能够为激素治疗的效果提供参考，帮助评估治疗方案的疗效。
卵巢早衰模型
（环磷酰胺腹腔注射诱导）
卵巢早衰（Premature Ovarian Failure, POF）指的是卵巢功能提前丧失，会导致动情周期紊乱，阴道涂片可监测动情周期变化，评估卵巢功能衰退和激素水平变化，探讨治疗手段的干预效果。
· 应用： 阴道涂片在卵巢早衰模型中的应用主要体现在监测动情周期的变化。卵巢早衰后，动情周期可能发生紊乱，阴道涂片通过观察上皮细胞的变化，能够帮助研究人员评估卵巢功能的衰退以及激素水平的变化，进一步探讨不同治疗手段（如激素替代治疗）对卵巢早衰的干预效果。
多囊卵巢综合征（PCOS）模型
（来曲唑灌胃诱导）
PCOS 表现为内分泌紊乱，阴道涂片可观察动情周期变化，评估卵巢功能紊乱和药物治疗效果。
· 应用： 在PCOS动物模型中，阴道涂片实验用于观察不同阶段的动情周期变化，特别是雌激素与雄激素的相对水平。阴道涂片能够帮助评估高雄激素状态下卵巢功能的紊乱，且通过细胞形态学变化，能够揭示多囊卵巢的特征性表现。此技术还能评估药物对PCOS治疗的效果，特别是在调节激素平衡和恢复正常排卵方面的作用。
子宫内膜异位症模型
（手术移植造模）
子宫内膜异位症是指子宫内膜组织在子宫腔外的异常生长，通常出现在卵巢、腹腔等部位。该疾病的动物模型通常通过移植异位内膜组织或高雌激素环境诱导。
阴道涂片可研究内膜异位症发病机制，评估激素治疗对抑制内膜异位症的疗效。
· 应用： 阴道涂片在子宫内膜异位症模型中的应用主要集中在研究内膜异位症的发病机制。通过观察动情周期的变化，特别是在高雌激素的影响下，阴道涂片能够反映激素水平对子宫内膜异位症病变的影响。研究人员通过分析涂片结果，可以评估激素治疗（如雌激素受体拮抗剂）对抑制内膜异位症的疗效，为临床治疗提供数据支持。
六、总结
阴道涂片是研究动情周期和多种疾病模型的重要工具，也是多种疾病模型（如子宫腺肌症、卵巢早衰、多囊卵巢综合征、子宫内膜异位症等）的实验基础。通过观察动情周期，能深入探讨激素在疾病中的作用机制，评估治疗效果，为临床应用提供参考。作为简单有效的实验技术，其在疾病研究中作用重大，助力我们更好理解生殖生理和相关疾病的发生发展。
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