病理学技术是病理学诊断的基础，病理学技术的发展主导着病理诊断学的发展。最初我们谈论诊断，都是从形态学、组织学水平或生化水平来看的。病理学是研究疾病发生发展规律的学科，主要的研究范围是疾病发生发展过程中组织、细胞代谢、功能及结构的变化。 染色实验前期的组织处理对于最后的染色结果是很重要的，组织处理注意事项涉及多个环节，包括取材、固定、脱水、透明、浸润、包埋、切片、染色等步骤。

组织取材与固定

1、取材时应选择新鲜、大小适中的组织块，避免挤压变形，保尽量保持组织的原有形态和清洁。组织块力求小而薄（一般不超过2×1.5×0.3cm为宜）。

2、固定是关键步骤，通常使用10%甲醛溶液或其他固定液（如Carnoy固定液等），固定时间根据组织块大小确定（一般不宜超过24h），以防止组织自溶或腐败。

3、固定液的选择对后续染色效果有重要影响，例如Bouin's 固定液比较适用于染色效果好的组织。

组织固定的目的

1、破坏细胞内的溶酶体酶：组织离体后，失去氧的供应，细胞就会死亡并释放出溶酶体酶将细胞溶解，导致组织自溶。因此，组织固定的目的首先是立即杀死细胞并将溶酶体酶及膜结构固定，防止细胞自溶。

2、杀死外来细菌：组织离体后失去活力，如不及时固定，将成为一个良好的细菌培养基，在室温下极易使细菌生长繁殖，导致组织腐坏。

3、尽可能保持细胞活体时的原状：活细胞时的微细结构，核在有丝分裂的形态，细胞内含物的装置等，都要通过固定来完成。

4、凝固、沉淀细胞内原有的产物：细胞是由蛋白质、糖、脂类、各种无机盐和色素等组成，在固定过程中尽可能保持各种物质的不溶性或不被丢失，以利于在染色后显示出来。

5、使组织保持一定的硬度和弹性：在以后的脱水、透明、浸蜡等过程中不发生较大的扭曲和变形。

6、有利于区别各种细胞的折光率：固定使不同细胞或细胞内各种物质产生不同的折光率，在染色后有利于识别各型细胞的结构。

7、对组织的分析性染色起媒染作用：如用苦味酸的固定液固定组织可使结缔组织染色特别鲜艳等。

8、保存组织细胞内的抗原性：细胞内抗原性能完好保存，有利于免疫组化染色时的抗原抗体结合反应。

组织固定的注意事项

1、固定及时性：组织离体后，必须立即固定（在1小时内）。

2、固定液的选择：应该根据制作要求选择合适的固定液。

3、固定液用量：必须大于组织体积的4-10 倍。

4、固定液浓度：浓度必须准确，过稀或过浓都会影响组织的形态和固定的效果。

5、固定温度：室温或放于35-37℃的全封闭组织处理机内，温度过高，会加快组织的自溶和组织的过度收缩，并破坏细胞内的抗原和DNA。

6、固定时间：新鲜标本，应该剖开固定12-24小时后再取材。大标本取材后在室温下还需再固定4-6小时，小标本取材后应该在室温下再固定3-4小时，如果是新鲜小标本取材，必须再固定4-8小时。如果室内温度低，固定时间还需延长。固定时间不超过48小时。

7、需要做分子病理的标本，从标本离体至组织脱水开始，总固定时间一般不要超过24小时（厚度2mm），同时决不要少于6小时。

Bouin's 固定液

产品编号：BL-G016

主要成分：PA、甲醛、乙酸 应用范围：细胞和组织的固定 Bouin's 固定液常用于固定细胞和组织，以便进行后续的染色、观察和分析。

常用于免疫组化和染色、病理学研究及胚胎学研究等。 Bouin's 固定液还被用于一些特殊实验中。例如，在研究鸡法氏囊的显微结构时，Bouin's 固定液被用于固定组织并进行光镜观察。此外，Bouin's 固定液也被用于整体染色法中，以节省人力和物力。

戊二醛固定液（2.5%，电镜专用）

产品编号：BL-G014

主要成分：戊二醛、磷酸盐、去离子水等组成 pH7.2~7.4。

应用范围：

电镜标本制备：戊二醛固定液广泛用于电镜标本的固定，能够有效保存细胞和组织的原有形态结构，防止自溶和细菌感。

细胞生物学研究：适用于细胞核、细胞浆等细微结构的固定，常用于透射电镜观察

病理学研究：用于病理组织的固定，保持组织的超微结构清晰度

科研实验：作为科研试剂，用于各种生物学和医学研究。